产品介绍

基 因 型MATa, trp1-901, leu2-3, 112, ura3-52, his3-200, gal4Δ, gal80Δ,LYS2 : : GAL1UAS–Gal1TATA–His3, GAL2UAS–Gal2TATA–Ade2 URA3 : : MEL1UAS–Mel1TATA  AUR1-C MEL1简 要 说 明Y2HGold菌株是Clontech集团公司规划设计的GAL4模式鲜鲜发酵粉菌粉粉菌双杂实践用菌株，MATa型，可直接性转为质粒或与MATα型鲜鲜发酵粉菌粉粉菌菌株Y187要 mating实操做出蛋清酶互作安全验证或筛库耐压。Transformation  marker为: trp1, leu2，计划书模板DNA组为：AbAr, HIS3, ADE2, MEL1。Y2HGold -GAL4鲜鲜发酵粉菌粉粉菌双杂模式须要几种质粒生活设施采用：PGBKT7和PGADT7。质粒PGBKT7的选择图标logo为TRP1，适用呈现方式方法DNA-BD(源于鲜鲜发酵粉菌粉粉菌转录系数GAL4N端1~ 174位碳水化合物)与个人目标值蛋清酶(Bait)的相相交融蛋清酶；质粒PGADT7的选择图标logo为LEU，适用呈现方式方法AD(GAL4 东东助手768 ~881 位碳水化合物)与个人目标值蛋清酶（Prey）的相相交融蛋清酶。GAL4模式方式：一位完全版版的鲜鲜发酵粉菌粉粉菌转录系数GAL4可构成特点上双方独立性的的两个材料域：处于N端1 ~ 174位碳水化合物区间的DNA紧密联系域（DNA-BD）和处于东东助手768 ~881 位碳水化合物区间的转录启用码域(AD)。DNA-BD要辨识GAL4-responsive gene的上中中上游启用码编码序列UAS，并与之紧密联系。而AD可不会启用UAS中上游的DNA组做出转录。BD和AD重新会出现没有启用码转录，但当新风系统取决于时，则出现完全版版的GAL4化学活化，使含UAS的启用子中上游DNA组转录呈现方式方法。正常情况情况下的条件下，BD不与AD紧密联系，将会查重的蛋清酶质各用与BD和AD相相交融，变成 bait 相相交融蛋清酶（bait -BD）和 prey 相相交融蛋清酶（prey-AD），这样 bait 和 prey产生双方功效，还会促成 BD 和 AD 的双方取决于，变成完全版版的GAL4，关键在于启用码计划书模板DNA组的转录。Y2HGold有两个计划书模板DNA组：AbAr, HIS3, ADE2, MEL1，各用由多种与众有所差异的启用子（G1，G2，M1）启用，这多种启用子只能有GAL4辨识的17bp管理处区同一，之外一部分均与众有所差异，小臭较低了鲜鲜发酵粉菌粉粉菌双杂假阳型产生的慨率。不但新计划书模板DNA组AbAr与此前的美味不足计划书模板DNA组相对比存在更低蓝本的优越性，也可不会较低鲜鲜发酵粉菌粉粉菌双杂假阳型产生的慨率。High5TM全系列Y2HGold体会态血癌細胞膜经特色工艺设备设计制作，-80℃可储存四个月时间，经PGADT7质粒查重转为极限进程>104cfu/μg DNA 。操 作 说 明1.取1管体会态血癌細胞膜置冰里化掉，6 000 rpm离心分离分离分离1min，消去上清。2.加如320 μl LiTE/PEG稀硫酸，重悬血癌細胞膜，最后加如10μl Carrier DNA(95-100 度5min 迅速冰浴，再次每次)，预冷决定性目的质粒2-5ug,面积非常少于20ul。3.宽裕混匀，于30度250 rpm转数下培植30 min。4.42度热激2.5min。5.6000 rpm离心分离分离分离1min，消去上清。6.加如1 ml TE稀硫酸，有一个温和重悬血癌細胞膜。7.6000 rpm离心分离分离分离1min，消去上清。8.加如100 μl TE稀硫酸，重悬血癌細胞膜，将血癌細胞膜涂抹于对应的美味不足型固态物体生成培植基。9.30度上下颠倒培植48-96h，就此变成尺寸大小应该的鲜鲜发酵粉菌粉粉菌菌落。Preparation of Media：YPDA （1L）:Tryptone                20gyeast extract             10g 0.2% adenine            15ml保湿皮肤补水到 950ml，  用稀盐酸调PH到 6.5Agar                20g (for plates only)121度，1430分钟高电压消毒， 待培植基温暖降成55度时，加如已滤水的40% 红提糖 50 ml 0.2% adenine(1L)Adenine    2g保湿皮肤补水 到1L， 溶解性后高电压消毒或0.22um 滤膜滤水除菌注 意 事 项1. 体会态血癌細胞膜做好在冰里化掉。2.转为高氧浓度的质粒可对应增多决定性适用涂板的菌量。3.另外转为2-3种质粒时可增高质粒的的使用量。4.Y2HGold鲜鲜发酵粉菌粉粉菌菌株对高温天气比较敏感，最适滋生温暖为27-30℃；高出31℃，滋生极限进程和转为极限进程呈数据减少。5.菌落变粉不能环境污染，是鲜鲜发酵粉菌粉粉菌血癌細胞膜滋生中一位一般干涉现象。当血癌細胞膜在安卓板式培植几天会，安卓板式上的Adenine被鲜鲜发酵粉菌粉粉菌耗电量用完，鲜鲜发酵粉菌粉粉菌企图要 自分解有效有效途径生成Adenine以供凭借，以至于，Y2HGold的ADE2DNA组被受损，Adenine生成有效有效途径受阻碍；又犹豫其ADE4,5,6,7,8DNA组均正常情况情况下，于是诱发后面终产物P-ribosylamino imidazole（AIR）在血癌細胞膜中掌握而使菌落变的粉红。6.鲜鲜发酵粉菌粉粉菌在不足培植基中滋生极限进程比YPDA培植基慢，培植基中不足材料越低，滋生很慢，以转为涂板试对：涂YPDA安卓板式29℃，48h培植可見截面积1mm克隆；涂SD单缺安卓板式29℃，48-60h培植可見截面积1mm克隆，涂SD双缺安卓板式29℃，60-80h培植可見截面积1mm克隆，涂SD三缺或四缺安卓板式安卓板式29℃，80-90h培植可見截面积1mm克隆。  

此产品需要干冰运输发货，会根据路途及包装大小收取一定的干冰运费。