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基 因 型Agrobacterium rhizogenes (strR,CamR ) Ar Qual Ri (agropine type)简 要 说 明发根农杆菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)农杆菌属(agrobacterium)的一种生活革兰氏阴性化土地大肠杆菌，它就能够感柒大部份数双子叶观赏藤本观赏植物和极少数订单叶观赏藤本观赏植物各类某个裸子观赏藤本观赏植物。Ar.Qual发根农杆菌菌株包含的农杆碱型Ri质粒，极具广泛性的宿体範圍（王米，香烟，番茄，脐橙等），互相极具链霉素，氯霉素抗性。AngYuBi动物制作的Ar.Qual发根农杆菌电转收获态特点不适应用在大质粒的转换：经pCAMBIA2301质粒 (size:11633 bp)的检侧转换生产率>105 cfu/μg DNA；经pCAMBIA2301-ZH质粒（size:40 kd）的检侧转换生产率电动车续航5×103 cfu/μg DNA。 操 作 说 明1. 0.1 cm触电杯和杯盖从补充液中拿走倒放于纯净的吸潮性白纸五几min，待其沥干油分，正置五几min，使工业乙酸乙酯有力蒸发掉物，待工业乙酸乙酯蒸发掉物纯净马上添加图片冰中，压实度冰面，电极材料杯顶离冰面0.5 cm以方便简洁扣上杯盖，冰中静置五几min有力变凉。2. 取-80℃另存的农杆菌收获态添加图片冰中五几min，待其溶化，申请申请进入0.01-1 μg质粒DNA（大小并不不低于6ul，较好用化学制剂盒抽提，双蒸水溶化；转换生产率较高，第1次应用前较好做预检测断定所加质粒的量），手去咨询管底混匀，马上添加图片冰中，用200 μl枪头将收获态-质粒交织物如何尽快移到触电杯内，扣上杯盖，空管删去五定。3. 初始化电转仪，设计规格：C=25 μF，PC=200 ohm，V=2400 V（此规格为Biorad 比较适合，应用者也可按所配电转仪比较适合的protocol使用），将触电杯从冰中拿走，吸潮性纸吸走外层面含水，如何尽快置入电转槽中，初始化触电，触电成功完成如何尽快添加图片冰中，申请申请进入1 ml无四环素类的TY，并更换到收获态空分液漏斗，28℃自由振荡的训练2~3一小时。4. 6000 rpm离心式一几min收菌，留取100 μl上下上清慢慢吹打重悬菌块施胶于含相对应的四环素类的TYpad上，倒放放于28℃的训练箱的训练2-3天注 意 事 项1. 申请申请进入质粒时大小不应该不低于收获态大小的1/10；质粒不纯或存有工业乙酸乙酯等生物碳物空气污染，转换生产率激增回落；质粒提升好几倍，转换生产率回落一位数目级。2. 电转收获态神经元中切勿混进起泡，转换液剂值的质粒可相对应的以以减少终极应用在涂板的菌量。3. pad上弱阳反应克隆密相处大时，因此营养摄入达不到，弱阳反应克隆衍生减缓，菌落变小，关键在于刷出大的菌落，应以以减少质粒运用量或终极应用在涂板的菌量。4.  Ar.Qual极具链霉素、氯霉素抗性，切勿应用在极具链霉素抗性或氯霉素抗类别粒的转换。