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GV3101(pSoup-19)电击感受态细胞

    

GV3101(pSoup-19)Electroporation-Competent Cell

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S32886-50ul*10 ¥420.00 货期:1周 - - -
S32886-50ul*50 ¥1600.00 货期:1周 - - -
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产品介绍

基 因 型C58 (rifR) Ti pMP90 (pTiC58DT-DNA) ( gentR) Nopaline(pSoup-p19-tetR)简 要 说 明 P19球蛋白酶渠道于番茄丛矮疫情,可阻止宿主细胞多对外谎称源什么是dna的RNA遗忘定律,增长异源什么是dna转录本的动态平衡性,因而带动异源球蛋白酶的形容,多方面比较适合转什么是dna植被及盐业叶尖,拟南芥叶尖,番茄叶尖或原始质体的瞬时形容机系统中。GV3101菌株为C58型游戏 背景,核什么是dna中具有刺激性挑选标记——利福平抗性什么是dnarif,因为能够以及流量和变因为成作业,此菌株随身携带一无产品转运司技能的胭脂碱型Ti质粒pMP90 (pTiC58DT-DNA),此质粒具有刺激性vir什么是dna (vir什么是dna是T-DNA添加图片植被什么是dna组必需品的电子器件,pMP90 (pTiC58DT-DNA)质粒产品的T-DNA转交技能被受到破坏,但可以益处存入的双元的载体T-DNA顺利提交转交)。pMP90 (pTiC58DT-DNA)型Ti 质粒具有刺激性挑选标记:gent,体现GV3101菌株庆大霉素抗性;在GV3101菌株中存入help质粒:pSoup-p19仅以GV3101(pSoup-p19)菌株,可益处pGreen,62SK,pGs2等质粒在农杆菌中读取,同一时间体现该菌株四环素(tet)抗性。的用人群于拟南芥、盐业、粘玉米、洋芋等植被的转什么是dna作业。海洋生物研发的GV3101 (pSoup-p19)电转感觉态越来越的用人群于大质粒的流量和变因为成:经pGs2(卡那霉素抗性)质粒检查测量流量和变因为成速率>105 cfu/ μg DNA;经pGs2-ZH(卡那霉素抗性)质粒(size:40 kd)检查测量流量和变因为成速率高达5×103 cfu/μg DNA。操 作 说 明1. 0.1 cm高压雷触电杯和杯盖从儲存液中取出上下颠倒于整洁的储水书本上分之五钟,待其沥干含水分,正置分之五钟,使酒精有效充分地的易挥发物,待酒精易挥发物整洁随时添加图片冰中,夯实冰面,电极材料杯顶离冰面0.5 cm以便利扣上杯盖,冰中静置分之五钟有效充分地的上升。2. 取-80℃保存图片的农杆菌感觉态添加图片冰中分之五钟,待其熔化,添加1-5 μg质粒DNA(质粒球量大概并不超出6ul,是最好的用生化试剂盒抽提,双蒸水溶化),手摸打电话管底混匀,随时添加图片冰中,用200 μl枪头将感觉态-质粒融合物怏速移到高压雷触电杯杯,扣上杯盖,空管删去存用。3. 初始化电转仪,制定基本指标:C=25 μF,PC=200 ohm,V=2400 V(此基本指标为Biorad 最新引荐,的提供者也可按用到的到的电转仪最新引荐的protocol作业),将高压雷触电杯怏速放在电转槽中,高压雷触电提交怏速添加图片冰中,添加700 μl无抗生素类类的LB并转交到感觉态空分液漏斗,28℃谐振培训2~3个小时。4. 6000 rpm离心分离一钟头收菌,留取100 μl左右时间上清轻柔吹打重悬菌块涂抹于含相关的抗生素类类的LB或YEBuv上,上下颠倒放于28℃培训箱培训2-3天(当uv只具有刺激性50 μg/ml kan 时,28℃培训48 h就可以了;uv行同一时间添加50 μg/ml kan,20 μg/ml rif 时,需28℃培训60 h;若果的用的uv具有刺激性50 μg/ml rif 则要求28℃培训72-90 h)。注 意 事 项1. 添加质粒时球量大概不可超出感觉态球量大概的1/10;质粒不纯或有酒精等化学物质物污染问题,流量和变因为成速率骤降上升;质粒曾大几倍,流量和变因为成速率上升另一个数目级。2. 流量和变因为成高氨水溶液浓度值的质粒可相关的少决定性比较适合涂板的菌量。3. uv上阳型克隆密面对大时,由营养元素不到位,阳型克隆种植超慢,菌落变小,因为能够赚取大的菌落,应少质粒储电量。4. 利福平氨水溶液浓度值不可高过25 μg/ml,过高的利福平氨水溶液浓度值克于农杆菌种植,会大大减少其种植错误率和流量和变因为成速率。本司感觉态核算流量和变因为成速率时候用到的uv只具有刺激性50 μg/ml kan,若用到的到的uv具有刺激性20 μg/ml rif则流量和变因为成速率大大减少到1/2。5. 培训基中添加利福平的作用是避免 杂菌种植、挑选农杆菌;基于用到的到的菌株抗性添加链霉素或庆大霉素可避免 Ti质粒丢了,但链霉素克于农杆菌的转什么是dna作业,所以咧一样培训农杆菌时不决定链霉素或庆大霉素,Ti质粒丢了的概率分析不高。

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储存条件: -80℃
用途: 根癌农杆菌感受态细胞
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参考文献

质检证书(COA)

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批号:JS298415 货号:S20001-25g
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摩尔浓度计算器

质量 (mg) = 浓度 (mM) x 体积 (mL) x 分子摩尔量 (g/mol)

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