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GV3101(pSoup)电击感受态细胞

    

GV3101(pSoup)Electroporation-Competent Cell

国产
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S32884-50ul*10 ¥420.00 货期:1周 - - -
S32884-50ul*50 ¥1600.00 货期:1周 - - -
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产品介绍

基 因 型C58 (rifR) Ti pMP90 (pTiC58DT-DNA) ( gentR) Nopaline(pSoup-tetR)简 要 说 明 GV3101(pSoup)菌株为C58型情况,核遗传遗传表观遗传中内含淘汰商品元素——利福平抗性遗传遗传表观遗传rif,要更好地转变成方法,此菌株随带一无自己转运平台功效的胭脂碱型Ti质粒pMP90 (pTiC58DT-DNA),此质粒内含vir遗传遗传表观遗传 (vir遗传遗传表观遗传是T-DNA加进作物遗传遗传表观遗传组必不可少的电子器件,pMP90 (pTiC58DT-DNA)质粒自己的T-DNA转给功效被破碎,但就能够益处转给的双元媒介T-DNA工作顺利转给)。pMP90 (pTiC58DT-DNA)型Ti 质粒内含淘汰商品元素:gent,拥有GV3101菌株庆大霉素抗性;在GV3101菌株转车给help质粒:pSoup仅以GV3101(pSoup)菌株,可益处pGreen,62SK,pGs2系列产品质粒在农杆菌中编辑,时候拥有该菌株四环素(tet)抗性。安全使用的来拟南芥、香烟、玉米棒子、胡萝卜等作物的转遗传遗传表观遗传方法。生物工程开发建设的GV3101(pSoup)电转感想怎么写态特意安全使用的来大质粒的转变成:经pGs2(卡那霉素抗性)质粒测量转变成高能力>105 cfu/μg DNA;经pGs2-ZH(卡那霉素抗性)质粒(size:40 kd)测量转变成高能力可以达到5×103 cfu/μg DNA。操 作 说 明1. 0.1 cm雷击杯和杯盖从存贮液中扔掉倒放于干静的吸水性书本上两半个小时英文,待其沥干含水分,正置两半个小时英文,使酒精有效充分均匀溶解,待酒精充分均匀溶解干静立刻加进冰中,压实系数冰面,电极材料杯顶离冰面0.5 cm以便盖紧杯盖,冰中静置两半个小时英文有效制冷。2. 取-80℃导出的农杆菌感想怎么写态加进冰中两半个小时英文,待其冰化,进入1-5 μg质粒DNA(质粒面积大小不是很不超6ul,最棒用免疫试剂盒抽提,双蒸水充分均匀溶解),用力呼叫管底混匀,立刻加进冰中,用200 μl枪头将感想怎么写态-质粒组合物物更快移到雷击杯内,盖紧杯盖,空管永久保存以备。3. 开机启动电转仪,配置技术参数值:C=25 μF,PC=200 ohm,V=2400 V(此技术参数值为Biorad 推送,安全使用的者也可按适用电转仪推送的protocol方法),将雷击杯更快加进电转槽中,雷击搞定更快加进冰中,进入700 μl无抗菌素的LB并转给到感想怎么写态空管上,28℃震荡培育2~3小时英文。4. 6000 rpm离心式一半个小时英文收菌,留取100 μl前后上清轻松吹打重悬菌块涂抹于含相对应抗菌素的LB或YEBpad等上,倒放放于28℃培育箱培育2-3天(当pad等只内含50 μg/ml kan 时,28℃培育48 h就行了;pad等中时候进入50 μg/ml kan,20 μg/ml rif 时,需28℃培育60 h;若是 安全使用的的pad等内含50 μg/ml rif 则须得28℃培育72-90 h)。注 意 事 项1. 进入质粒时面积大小本就不是不超感想怎么写态面积大小的1/10;质粒不纯或产生酒精等磷化合物物水污染,转变成高能力急聚回落;质粒提高增加一倍,转变成高能力回落另一个占比级。2. 转变成高氧化还原电位的质粒可相对应才能才能减少最后用来涂板的菌量。3. pad等上呈抗体阳性克隆密相处大时,是由于蛋白质缺乏,呈抗体阳性克隆产生大幅度降底,菌落变小,要荣获大的菌落,应才能才能减少质粒需水量。4. 利福平氧化还原电位本就不是如果超过25 μg/ml,过高的利福平氧化还原电位不有益于于农杆菌产生,会大幅度降底其产生快速和转变成高能力。本平台感想怎么写态核算转变成高能力时适用pad等只内含50 μg/ml kan,若适用pad等内含20 μg/ml rif则转变成高能力大幅度降底到1/2。5. 培育基中进入利福平的重要性是放到杂菌产生、淘汰农杆菌;跟据适用菌株抗性进入链霉素或庆大霉素可放到Ti质粒遗失,但链霉素不有益于于农杆菌的转遗传遗传表观遗传方法,因此 基本培育农杆菌时不考虑的链霉素或庆大霉素,Ti质粒遗失的几率不高 。

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储存条件: -80℃
用途: 根癌农杆菌感受态细胞
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参考文献

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批号:JS298415 货号:S20001-25g
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摩尔浓度计算器

质量 (mg) = 浓度 (mM) x 体积 (mL) x 分子摩尔量 (g/mol)

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