产品介绍

基 因 型C58 (rif R) Ti pMP90 (pTiC58DT-DNA) ( gentR/strepR) Nopaline简 要 说 明GV3101菌株为C58型环境，核dna中带有需求产品价格标签——利福平抗性dnarif，为了能够更好地还原成运营，此菌株挟带一无企业内在运送功用的胭脂碱型Ti质粒pMP90 (pTiC58DT-DNA)，此质粒带有virdna（virdna是T-DNA填加仿真花草dna组需的器件，pMP90 (pTiC58DT-DNA)质粒企业内在的T-DNA转至功用被影响，但也可不可以帮住进入的双元质粒载体T-DNA太顺利转至）。pMP90 (pTiC58DT-DNA)型Ti 质粒带有需求产品价格标签：Strep和gent，授予GV3101菌株链霉素和庆大霉素抗性，使应的作业步骤在拟南芥、烟草公司的、米粒游小编、马玲薯等仿真花草的转dna运营。规划设计的GV3101电转感觉态非常使应的作业步骤在大质粒的还原成：经pCAMBIA2301质粒(size:11633bp)检则还原成率会达5×104cfu/μg；经pCAMBIA2301-ZH质粒（size:40kd）检则还原成率会达5×103cfu/μg。操 作 说 明1.0.2cm点击杯和杯盖从贮存液中不得不拿出反置于彻底的吸水能力纸中4半小时差不多差不多，待其沥干含水量，正置4半小时差不多差不多，使无水酒精能够完全发挥，待无水酒精发挥彻底及时填加冰中，填筑冰面，电极材料杯顶离冰面0.5cm以便盖住杯盖，冰中静置4半小时差不多差不多能够完全变凉。2.取-80℃保管的农杆菌感觉态填加冰中4半小时差不多差不多，待其冰化，填加1-5ug质粒DNA（质粒比热容并不少于6ul，做好用采血管盒抽提，双蒸水溶解完），拿手打管底混匀，及时填加冰中，用200ul枪头将感觉态-质粒混后物快移到点击小杯，盖住杯盖，空管的作业步骤待会儿用。3.开机电转仪，布置性能参数值：C=25uF，PC=200ohm，V=2400V（此性能参数值为Biorad 比较适合，的大家也可按常用电转仪比较适合的protocol运营），将点击杯快放至电转槽中，点击完成任务快填加冰中，填加700ul 无抗菌药的LB并转至到感觉态空管上，28℃振荡器塑造2~3小时差不多。4.6000rpm离心力一半小时差不多差不多收菌，留取100μl差不多上清悄悄吹打重悬菌块涂装于含特定抗菌药的LB或YEBuv上，反置放于28℃塑造箱塑造2-3天（当uv只带有50ug/ml kan 时，28℃塑造48h既可不可以；uv至时填加50ug/ml kan，20ug/ml rif 时，需28℃塑造60h；要的作业步骤的uv带有50ug/ml rif 则需28℃塑造72-90h）。注 意 事 项1.填加质粒时比热容不可少于感觉态比热容的1/10 ；质粒不纯或产生盐，无水酒精等严重污染，还原成率激增变低；若还原成大质粒或想获得了较高还原成率，比较适合的作业步骤高纯质粒导出采血管盒导出质粒。质粒增加好几倍，还原成率变低这个量级。2.掺进质粒中应轻盈运营。3.还原成高密度的质粒可特定缩减之后应的作业步骤在涂板的菌量。4.利福平密度不可高出25ug/ul，过高的利福平密度不有助于农杆菌植物的种植，会大幅度降低了其植物的种植速度慢和还原成率。本公司的感觉态运算还原成率时常用uv只带有50ug/ml kan，若常用uv带有20ug/ml rif则还原成率大幅度降低了到1/2。5.塑造基中填加利福平的目的性是严防杂菌植物的种植、需求农杆菌；给出常用菌株抗性填加链霉素或庆大霉素可严防Ti质粒顺坏，但链霉素不有助于农杆菌的转dna运营，故平常塑造农杆菌时不要考虑链霉素或庆大霉素，Ti质粒顺坏的几率较低（也可不可以失去）。

此产品需要干冰运输发货，会根据路途及包装大小收取一定的干冰运费。