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基 因 型F- ompT hsdSB(rB-mB-) gal dcm araB::T7RNAP-tetA简 要 说 明High5TM系统BL21(AI) 感想态上皮人体生殖肿瘤人体肿瘤组织系膜是直肠杆菌B/r型菌株(E.coli B/r)，BL21(AI) 收入于BL21菌株，为膜外球球血清酶酶OMPT的一些缺陷型菌株。该酶的欠缺要更可能有效性放到呈现的异源效果球球血清酶在菌肚子里的吸附。安全采用L-阿拉伯糖引导araBAD加载子上游的球球血清酶呈现。安全采用匍萄糖也可能缓和araBAD加载子上游的球球血清酶呈现。BL21(AI) 感想态上皮人体生殖肿瘤人体肿瘤组织系膜使代替其中以T7加载子为基础上的呈现媒介，要做出高品质的资产协同球球血清酶呈现。这是因为菌株肚子里的T7 RNA聚合反应酶品质要做出更可能有效性调高，BL21(AI) 感想态上皮人体生殖肿瘤人体肿瘤组织系膜要更可能有效性呈现对其余BL21上皮人体生殖肿瘤人体肿瘤组织系膜致癌或滋生期缓和的球球血清酶。从BL21(AI) 菌株中拿到效果资产协同球球血清酶生产产出量，和其余BL21菌株生产产出量一定。High5TM系统BL21(AI) 感想态上皮人体生殖肿瘤人体肿瘤组织系膜由特种工艺设备开发经pUC19质粒检查和转换成了成功率达到了108cfu/μg。 操 作 说 明1.取100μl雪上冰化的BL21(AI)感想态上皮人体生殖肿瘤人体肿瘤组织系膜，添加效果质粒并用适当的力度悄悄的混匀，雪上静置2两半个小时。2.42℃水浴热激90秒，尽快放回雪上并静置2半个小时，摇晃会变低和转换成了成功率。3.向离心法分离管上添加700μl不包括四环素的无茵培養基（2YT或LB），混匀后37℃，200rpm恢复60半个小时。4.5000rpm离心法分离一半个小时收菌，留取100μl上下上清用适当的力度悄悄的吹打重悬菌块并涂装到含50 µg/ml四环素及相对应的质粒需求四环素的2YT 或LB培養基上。5.将平板电脑苹果反置放于37℃培養箱一晚培養。注 意：1.Brian Caliendo (Voigt 工作室)通讯报道过pCP20质粒更加很难和转换成了到这一感想态上皮人体生殖肿瘤人体肿瘤组织系膜中，而pCP20和转换成了到其余菌株里都很常见，是菌体因为末知。2.虽然不放匍萄糖，BL21(AI) 上皮人体生殖肿瘤人体肿瘤组织系膜的araBAD加载子上游的本底球球血清酶呈现品质仍旧很低，添加匍萄糖后要进那步的变低本底球球血清酶的呈现品质。3.注 意 事 项1.感想态上皮人体生殖肿瘤人体肿瘤组织系膜较好在雪上冰化。2.混在质粒应该轻盈方法。3.和转换成了高盐溶度的质粒可相对应的降低从而代替涂板的菌量。4.引导时，IPTG盐溶度供考虑（0.1-2mM均可）。5.为拿到必须 量的球球血清酶，最佳的引导時间，环境温度，IPTG盐溶度需工作者优化系统。小编建议考虑该菌株做出球球血清酶呈现的條件详细：1.安全采用T7加载子媒介（高复制又或者低复制都也可能）做出球球血清酶呈现。2.安全采用其余BL21做出球球血清酶呈现时，了解到凸显的菌滋生期的缓和用处。3.呈现其中一个之比的致癌性球球血清酶。

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