产品介绍
简绍:链亲和素(SA)是阿维丁链结核杆菌(Streptomyces avidinii)理解的1种小氧原子核蛋白。本肉食品为127AA佳本质构成,每氧原子SA相结合实际4个生态学素氧原子,国际联盟比活性酶12~15U/mg。SA与禽类亲和素(Avidin,AV)比起特情人更强,与生态学素相结合实际后半衰期历时6h,而AV半衰期仅为1h。会因为SA含有糖基且等电点取决于比较适中,于是SA在检查适用中都具有比AV更低的非特情人背景图案。
的用途:本相关食品已广泛appapp于制法SA-偶联酶药物制剂(如SA-HRP,SA-AP等),SA-偶联荧光素(即荧光纺织染料,如SA-FITC,SA-Cy2,SA-Cy3等)、SA-偶联磁珠等,从而参加酶联天然免疫检测吸出监测(ELISA)、天然免疫检测组化、亲和色谱动物填料、含StrepTagII标贴(8-AA寡肽)的球蛋白纯化、动物调节器器、动物nm微球、预靶点医药探究、动物IC芯片被料等动物技术工艺的领域。
特征:高感染力,高偶联速度。
特别注意事情:
1.冻干粉水解后应预防波动冻融,意见与建议散装成小包装设计后都冻存。
2.冻干粉中含20mMNa2CO3 pH9.5的降低风险管理体系,若动用在包被,酶标会完毕动用。若动用在悬浊液金,做好自动调节pH或透析后动用。消融后完毕动用目的做好,不能够4℃常年摆放。
3.若用以ELISA包板,氢氧化铁金烘金,硝酸铵植物膳食纤维膜中用SA划线后必须干燥包存,包被液或缓冲器液中需要加入20%绵白糖作化学活化确保剂。
【进行操作步凑的概述了】
一、纳米纤维板包被
1、用碳酸钠减慢饱和溶液(pH 9.6)融解冻干粉,将有机废气浓度直接稀释就可以成3-10ug/ml(企业可确定系数去研究)
目光:主要是因为SA等电点是7.4,包被不建意运用弱酸性降低液
2、用移液器产生100ul/孔,4℃一晚包被甚至37℃包被2h;
3、清洗:倒尽板孔中溶剂,加200ul清洗液,静放十二分钟左右,对此2次,之后将反應板倒放在吸水性A4纸,使孔中清洗液流尽,扣干
4、事件开启开放式、洗衣、抗原抗体阳性依照方法
若不之后打开中游科学实验,包被板须要做出烤干储存时。包被前,将包被液里添加入20%绵白糖成为催化活性自我清洗剂。
二、SA偶联磁珠
2.1 NHS 滋养
1、全面混匀磁珠后,取100μl PangoBeads COOH 磁珠到1.5 ml 离心法管上,放置在剩磁拆分出来上,待固液拆分出来后除掉上清液;
2、取200μl MES稀硫酸(25mM,pH 5.0)建立到抽滤式管上,放置于永磁铁分離法上,待固液分離法后清理上清液。去重复该工作步骤1 次;
**3、不断建立新配好的凉茶的50μl EDC 稀硫酸和50μl NHS 稀硫酸 (均为50mg/ml, 往以上MES 配好的凉茶)到放有磁珠的抽滤式管上,漩涡混匀使磁珠积极主动浮窗,室内温度松垮直混合型喂养30min;
**4、化学反应收尾后,建立100μl 以上 MES 稀硫酸洗衣 2 次;(产甲烷环境不能长时刻储存,
提倡直接来进行偶联)
2.2 球蛋白偶联
1、将抽滤管放至永磁铁上,区分删去上清液,注入100μl球蛋白质盐溶液(25 mM MES,pH 5.0)
轻快地混匀;(球蛋白质密度在0.1-2.0mg/ml)
2、在高温耷拉直相溶化学反应2h,或在4℃情况耷拉直相溶住宿;
3、表现尾声后将离心式管至于磁分離墙上,带磁分離删去上清液,进入1ml工业乙醇胺氢氧化钠溶液
(3M,pH9.0)洗涤剂磁珠 2 次;
4、加1ml无水乙醇胺饱和溶液(3M, pH 9.0)于离心式力管内,涡流30s,将离心式力管放至垂线混和
仪中常温响应1-2h;
5、反映完结后,将离心法管置入磁力链接墙上,待固液转移后退除上清液,那么申请加入100μl
纯化水柔和涡旋压缩机 30s,磁吸转移,抄袭该具体步骤 1 次;
6、添加不过要适的同步保持液(可基于必须要 来认定同步保持溶剂的添加量,以更改偶联配体磁珠的添加不过要适的同步保持液(可基于必须要 来认定同步保持溶剂的添加量,以更改偶联配体磁珠的浓硫酸浓度)同步保持于4°,如果你固定的的怪物配体安全,不错在同步保持溶剂中添加0.02%(W/V)叠氮化钠充当抗菌剂。
外观:
冻干粉
敏感性:
对热敏感,易吸潮
储存条件:
-20℃
用途:
Applications for enzyme-labeled (HRP, AP) streptavidin: Enzyme immunoassays (EIA), including enzyme-linked immunsorbent assays (ELISA) with biotinylated antibodies Cell and tissue staining (for light microscopy) Western blotting (WB) and other membra
注意:
部分产品我司仅能提供部分信息,我司不保证所提供信息的权威性,仅供客户参考交流研究之用。
参考文献(15篇)
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