产品介绍
为先组 E. coli 菌株,其人类基因组组中兼备收入于 Thermusaquaticus YTI 中克隆的 Taq DNA polymerase 人类基因组。本厂品是一个种热不稳性酶,团伙量一般为 94kDa。它与纯天然 Tag DNA 配位聚合物酶有重复的功能模块。在 Mg 2+留存的的条件下可催化剂的作用核苷酸沿 5’→3’放向构成配位聚合物生理反应,构成双链 DNA;并且它还兼备 5’ →3’外切酶亲水性。
用本品测序拥有的 PCR 化合物的 3´端附很多个"A"碱基,以至于可进行克隆于 T-Vector 中。
生物的定位:在 74℃经济条件下,30 15分钟内促使 10nmol 的 dNTP 添加酸不可溶性沉垫物所必需要的酶量的定位为一两个生物企业。
低温干燥必要条件: 20 mM Tris-HC(l pH 8.0,25℃),100 mM KCl,0.1 mM EDTA,1 mM DTT,0.5% NP-40 ,0.5% Tween -20 ,50%Glycerol
作用情况: 50mM KCl, 10 mM Tris-HCl (Ph8.6,25℃), 0.1% Triton X-100 ,1.5mM MgCl2.
水平保障:本品经 PCR 验正,亲水性旋光度的法测,内切核酸酶/缺刻酶旋光度的法测和 SDS-PAGE 饱和度司法鉴定。保障物料的水平平稳靠得住。
运行注重:拿来酶活性氧减退外,中所缘由也会会导致PCR扩增不了
(1)范例不要或太少;(2)土样中会出现 Mg 2+ 络合剂,引发 Mg 2+实际的溶度过低;(3) PCR 仪工作温度不让; (4) 临床药学来自的土样中包含有未命名的 Taq 酶可抑中药制剂; (5) 引物区域光降解塑料;(6) dNTP 区域光降解塑料;(7) Taq 酶使用很小等。
改进措施:每 50 微升化学反应机制中,酶摄入量为 0.5-1 微升最后,酶量少可能会增加高效率较弱,运行时请需要注意!
妙用:
1) 一般 PCR 鉴定会。
2) 小片断指标基因遗传克隆(个性化推荐小于等于 500bp)。
3) 标上 DNA 3’-端部。
4) 平端 PCR 产品加“A”。